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潇湘晨报 08-02

核酸检测结果为何不能立等可取?检验科专家揭秘新冠核酸检测全过程

目前,新冠疫情防控形势严峻,核酸检测需求量大增。众多市民在完成核酸采样后,都希望能像血常规等检查一样结果立等可取。对于以上各种疑问,长沙市第一医院检验科副主任陈勇为大家详细解答有关问题。

一般人眼中的核酸检测流程:取标本>>上仪器检测>>出结果。只需三步即可。然而,事实果真如此吗?

1. 标本采集

采样人员需要佩戴 N95 口罩、护目镜、隔离衣、防护服、双层乳胶手套、防水靴套等全套防护措施,采集完受检者的鼻咽拭子后,将拭子头浸入含病毒保存液的管中。被检者的准备和配合、正确地采集标本对检测结果至关重要,如果咽拭子样本质量不高,则很可能会造成假阴性。采集完的标本要迅速放入样本保存管中,保存管内保存液同时还具有灭活病毒的作用。

2. 标本转运

核酸采集点和检测点不在同一个地方,无法采一个送一个,而是隔一段时间批量转运一次标本,转运车辆和人员的调度,运送路途等因素,这些都需要时间。

不能就在采样点进行检测吗?陈勇介绍,核酸检测是极其灵敏且精密的实验,对环境要求很高,新冠病毒传染能力非常强,因此新冠核酸检测需要在相应等级的生物安全实验室中进行,以防实验过程中发生病原感染和泄露等事故,不是随便开辟个地方就能检测的。

3. 标本签收及录入

标本放置在专用转运箱里被护送到实验室,开箱前须用 75% 乙醇喷雾消毒;同时检查样本的密闭性,确认样本完好无异常,且样本是密封于标本密封袋内并贴有标识(患者姓名、样本种类、编号及采样时间),无外漏。

标本接收人员的个人防护需按采样人员防护装备执行。标本运送人员和接收人员对标本进行双签收,再人工录入信息系统,在大量标本蜂拥而至的情况下,还必须零错误率。

这个步骤需要一个一个拆包装,需做好生物安全防护,且拆包装仅为众多步骤中的一小步。

扫描条码、录入系统、编号,也是全手工操作。海量标本的情况下,还需要零错误率,杜绝张冠李戴或者标本遗漏的现象。

4. 提取核酸

标本到了实验室并非就能直接用于检测,还需要对标本进行震荡混匀,使样本管内核酸均匀分布。然后,技术人员再将标本里面的核酸提取出来,才能进行扩增和判读。

仍旧是海量标本,一个个拧开盖子,一个个用加样枪吸取标本进行核酸提取。往生物安全柜前一坐,连续拧开千个盖子,戳上千个枪头吸取上千个标本,然后再打掉上千个枪头,虽然操作不算很繁琐,但要保证每个动作精准到位,不出差错,防止交叉污染。

工作人员需要精神高度集中,而且如此炎热的天气,工作人员需要佩戴 N95 口罩、护目镜、隔离衣、防护服、双层乳胶手套、防水靴套等全套防护措施,操作不便,且不一会儿,工作人员就全身湿透。

5. 配制试剂

必须保证零污染,精确操作,多少份标本就需要配置多少份扩增试剂,需要多少份 EP 试管,又是几千个枪头的工作量,而且全手工分装,还要做好保护,千万不要污染了。一旦污染就前功尽弃,从头再来。

6. 加样

提取完成的核酸样本加入扩增用的反应液中,仍然是全手工操作,全程全神贯注,不能有丝毫干扰和分神。要不然很易搞混,不知道加到哪一标本了,稍有不慎就要所有的一切重新来过!

提取好的核酸只需要加入 5ul 进入试剂体系进行扩增,5ul 相当于一滴水的十分之一(大概 20 滴水是 1ml),用极小的枪头也只能看到头上那一点点,而且还要求操作过程:快!稳!准!

7. 上机检测

将所有提取好的核酸加入扩增反应液后放入扩增仪中,选好相应程序就可以开始扩增程序啦,这个过程就需要 1.5~2 个小时,而且仪器一旦启动扩增程序是不能停下来的,必须要等这一批的结果扩增完成后,才能进行下一批标本的扩增。

所以,这也是为什么核酸检测不能做到随到随测的原因之一。

陈勇介绍,除上述之外,在进行每一次检测时,工作人员还需要加入相应的各种阴性对照,弱阳性对照,阳性对照,环境质控,生理盐水对照等,用以监测此次实验全过程的质量,确保检测结果的可靠及准确。

毕竟实验过程太多步骤,存在太多潜在的干扰因素,需每批次都要采取同样的措施来确保检测质量。且一批次的实验做完后,还需要对生物安全柜,实验室台面及空气进行消毒后才能进行下一批次实验。

结果出来后,需要审核结果、核对标本信息、结果发放、数据传输等等。理论上,一次核酸检测周期至少需要 4~6 个小时才能出结果,检测报告在 12~24 小时对外发放(在线平台查询)。如果遇到大量标本涌来,所有配套物资和工作量都对应增长,出检测过节的时间也会相应延长。

潇湘晨报记者梅玫 通讯员 邓佳

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